在潔凈室環境中，微生物控制至關重要。受污染的環境可能導致產品召回，監管觀察，罰款甚至消費者死亡。為了防止，破壞和監視潔凈室中的微生物污染，必須了解潔凈室微生物學的幾個方面。這是無塵室微生物學文章系列的基礎介紹，討論了其中一些方面。第1部分和第2部分介紹了潔凈室微生物學，討論了指導文件和FDA的觀察結果，并概述了潔凈室中微生物污染的常見來源。第三部分提供了無塵室禮服程序的概述。后一篇文章將討論環境監測的概念以及消毒劑功效和正確清潔以及潔凈室檢測的重要性。

環境監測

根據21 CFR 211.113（b）：“公司必須遵循旨在防止聲稱是無菌的藥品受到微生物污染的適當書面程序。” 為了控制微生物污染，必須首先了解其來源。使用環境監視，公用事業監視和產品測試來了解這些來源。為了進行環境監測，對空氣中的活菌和非活菌顆粒進行采樣。此外，還對人員和表面進行了微生物污染取樣。如果回收了微生物，則可以使用它們的識別來幫助識別潛在的污染源以及可能需要的任何糾正和預防措施。

監視環境和設施的趨勢有助于確保防止污染的程序有效并且設施處于受控狀態。其他好處包括：通過在超限事件發生之前識別出關注的區域，使設施變得積極主動；幫助建立相關的警報級別；幫助建立設施的主要微生物和居民區系清單；以及提供歷史數據從而可以檢測到數據異常。

重要的是要清楚定義“趨勢”的外觀。該定義應包括在程序中，以在整個機構內和一段時間內提供一致的解釋。通常，趨勢被理解為是歷史數據的偏離或特定方向的偏離。1個警報級別應用作流程偏離其已建立控制狀態的預警系統。在沒有正當理由的情況下使用50％的行動水平在科學上是不合理的，在監管審核中可能會被反對。可以對趨勢數據執行統計分析，以基于設施的過程能力建立警報極限。例如，可以利用歷史數據并建立95％的置信區間，其中95％的采樣將被預期在建議的警報范圍內。

大多數預期行動級別已在多個監管文件中確定。如果監管機構未規定行動限值，例如，穿著工作服的人員（戴手套的人除外），則風險評估和統計分析可為建立行動限值提供依據。

污染恢復率在USP <1116>中進行了描述。它是用于趨勢分析結果的有用工具，該結果通常包含零菌落形成單位（CFU），例如在無菌過程環境監測中。USP <1116>指出：“由于微生物采樣方法的固有變異性，與著眼于從給定樣品中回收的菌落數量相比，污染物的回收率是趨勢結果更有用的度量。” 2污染回收率的計算方法是：將含有任何種類生長物的培養皿總數除以培養皿總數乘以100，得出一個百分比。USP <1116>還提供了有關無菌環境中建議的初始污染回收率的表格。

消毒功效和正確清潔的重要性

控制污染物進入潔凈室是整個清潔和消毒過程中關鍵的問題。3轉移到清潔區域的組件，人員，推車，儲罐，工具和儀器的清潔度至關重要。如果未對這些物品進行適當的消毒或清潔，或人員的穿著不當，則微生物很容易被運送到潔凈室。提供了討論消毒劑功效測試的多個指導文件和文章。兩個非常好的來源包括USP <1072>和PDA技術報告70。

必須先清潔物品，然后才能進行消毒或滅菌。清潔是從物體上清除異物的過程，并且消毒劑必須按預期工作。未清除的異物可能會阻止消毒劑與表面的微生物接觸。異物也可能與消毒劑產生負面反應并使它們失活。

難以清潔的區域受21 CFR 211.42約束。該法規要求光滑，堅硬的表面易于清潔。多孔表面會藏有微生物，使其難以回收用于環境監測。多孔表面還會使清潔和消毒過程中的微生物難以破壞。3難以觸及的表面可能會導致無法正確清潔的危險。

匆忙進行清潔，草率清潔或處理不當是危險的做法。更糟糕的是*跳過清潔過程。留下的污垢，油污，指紋和消毒劑殘留物會為微生物創造好客的棲息地，甚至保護潛在的微生物免受消毒劑的侵害。3遵循SOP并正確清潔以清除污物源是非常重要的，即使肉眼看不到它們也是如此。這將有助于確保消毒劑可以正常工作。

在消毒劑功效研究期間確定適當的消毒劑濃度。如果沒有正確準備，處理或使用消毒劑，則破壞微生物的效果可能會受到影響。3這可能導致微生物的生存。如果不正確使用和使用消毒劑，其有效性可能會受到影響。例如，縮短已建立的消毒劑接觸時間可以導致微生物存活。3即使正確配制并經常更換消毒劑溶液，骯臟的設備（例如拖把頭或水桶）也會影響消毒劑的有效性并導致微生物存活。3污染物可能會在不知不覺中散布到整個設施中。確保清潔設備的清潔和正確維護也很重要。

消毒劑必須符合在設施中使用的資格。在對消毒劑進行鑒定時，測試應包括工廠中發現的各種表面，這些表面代表壞的孔隙率和難清潔的表面。如果可能，選擇用于研究的微生物應包括從設施中分離出來的環境。在研究過程中，還將確定建議的聯系時間。術語“接觸時間”是指消毒劑保持濕潤并與被消毒表面接觸的時間。

應該在整個使用期間評估消毒劑的性能，以確定使用到期日。PDA技術報告70建議使用接近或稍微超過研究有效期的消毒劑。重要的是要注意，在使用A / B級之前，應對消毒劑進行無菌過濾或消毒，以防止消毒劑成為可擴散到整個潔凈室的污染源。

消毒功效測試和消毒程??序通常是監管審核中的熱門話題。為使流程順利進行，請做好準備，并以干凈的報告形式將所有數據匯總并整齊地組織起來。

結論

潔凈室微生物學涉及許多學科。可以參考潔凈室微生物學概念的多種指導文件和法規。為避免潛在的監管發現，請積極主動并在線發布研究警告信，并盡快糾正任何指出的程序空白。

為了控制微生物污染，必須控制無塵室中發生的所有活動，包括過程，程序，人員，原材料，賦形劑，組件，API，設施，設備，機器，環境，表面，空氣供應，公用事業，水來源，材料轉移，相鄰區域以及消毒和清潔方案。員工每次處理無菌產品時，必須遵循程序，使用適當的無菌技術，注意細節并格外小心。消費者的生活可能取決于員工的行為，其品行，正確控制的潔凈室以及潔凈室微生物學原理。